您的账号已在其他设备登录,您当前账号已强迫下线,
如非您本人操作,建议您在会员中心进行密码修改

确定
收藏 | 浏览334 | 下载128

目的 观察对氧磷酶1(PON1)基因过表达对急性敌敌畏中毒所致小鼠膈肌细胞损伤的影响.方法 常规培养小鼠膈肌细胞,转染过表达慢病毒载体,将细胞分为正常对照组,敌敌畏(DDVP)组,LV-GFP+ DDVP组,LV-PON1+ DDVP组,CCK-8法检测细胞存活率、流式细胞术检测细胞的凋亡情况、RT-PCR及Western印迹法检测小鼠膈肌细胞PON1和Nrf2mRNA及蛋白的表达情况、ELISA法检测细胞乙酰胆碱酯酶(AchE)、血红素氧合酶1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO-1)水平,化学比色法检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力及丙二醛(MDA)水平.结果 0、80、160、320、640 μmol/L DDVP诱导小鼠膈肌细胞24 h后,细胞的生存率分别为(100±3.82)%、(82.13 ±2.60)%、(53.57±5.05)%、(30.77±3.30)%、(14.20 ±2.19)%,呈浓度依赖性;以160μmol/L DDVP分别诱导小鼠膈肌细胞0、6、12、24 h后,细胞的存活率分别为(100.17±2.74)%、(76.13±6.01)%、(66.53±3.55)%、(53.57±5.05)%,呈时间依赖性(P<0.05).LV-PON1组细胞PON1蛋白表达高于空白对照组(0.370±0.015与0.232 ±0.004,0.197±0.015与0.037±0.003,P<0.05).DDVP诱导后,不同时间点LV-PON1组细胞存活率高于DDVP组(P<0.05).诱导24 h,LV-PON1组凋亡率及MDA含量低于DDVP组(P<0.

作者:吴斌;王菲;周觉;候跃辉;洪广亮;赵光举;葛赟;刘瑶;邱俏檬

来源:中华医学杂志 2015 年 95卷 36期

知识库介绍

临床诊疗知识库该平台旨在解决临床医护人员在学习、工作中对医学信息的需求,方便快速、便捷的获取实用的医学信息,辅助临床决策参考。该库包含疾病、药品、检查、指南规范、病例文献及循证文献等多种丰富权威的临床资源。

详细介绍
热门关注
免责声明:本知识库提供的有关内容等信息仅供学习参考,不代替医生的诊断和医嘱。

收藏
| 浏览:334 | 下载:128
作者:
吴斌;王菲;周觉;候跃辉;洪广亮;赵光举;葛赟;刘瑶;邱俏檬
来源:
中华医学杂志 2015 年 95卷 36期
标签:
有机磷 敌敌畏 乙酰胆碱酯酶 氧化应激 Organophosphorus Dichlorvos Acetylcholinesterase Oxidative stress
目的 观察对氧磷酶1(PON1)基因过表达对急性敌敌畏中毒所致小鼠膈肌细胞损伤的影响.方法 常规培养小鼠膈肌细胞,转染过表达慢病毒载体,将细胞分为正常对照组,敌敌畏(DDVP)组,LV-GFP+ DDVP组,LV-PON1+ DDVP组,CCK-8法检测细胞存活率、流式细胞术检测细胞的凋亡情况、RT-PCR及Western印迹法检测小鼠膈肌细胞PON1和Nrf2mRNA及蛋白的表达情况、ELISA法检测细胞乙酰胆碱酯酶(AchE)、血红素氧合酶1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO-1)水平,化学比色法检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力及丙二醛(MDA)水平.结果 0、80、160、320、640 μmol/L DDVP诱导小鼠膈肌细胞24 h后,细胞的生存率分别为(100±3.82)%、(82.13 ±2.60)%、(53.57±5.05)%、(30.77±3.30)%、(14.20 ±2.19)%,呈浓度依赖性;以160μmol/L DDVP分别诱导小鼠膈肌细胞0、6、12、24 h后,细胞的存活率分别为(100.17±2.74)%、(76.13±6.01)%、(66.53±3.55)%、(53.57±5.05)%,呈时间依赖性(P<0.05).LV-PON1组细胞PON1蛋白表达高于空白对照组(0.370±0.015与0.232 ±0.004,0.197±0.015与0.037±0.003,P<0.05).DDVP诱导后,不同时间点LV-PON1组细胞存活率高于DDVP组(P<0.05).诱导24 h,LV-PON1组凋亡率及MDA含量低于DDVP组(P<0.