目的 验证FN1和ZNF438是否为雄激素非依赖性前列腺癌细胞雄激素受体靶基因,并探索雄激素受体对FN1和ZNF438基因的表达调节作用.方法 采用染色质免疫共沉淀-实时荧光定量PCR及琼脂糖凝胶电泳技术验证雄激素受体(AR)作用于FN1和ZNF438基因.用双氢睾酮(DHT)刺激LNCaP-AI细胞及慢病毒干扰LNCaP-AI细胞AR的表达,通过逆转录荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)分析FN1和ZNF438基因的表达情况.结果 AR-ChIP实验组所富集到的FN1和ZNF438基因分别为7.274±0.290和6.843±0.078,显著高于IgG-ChIP对照组的1.004±0.113和1.000±0.014,差异有统计学意义(t=34.91、128.377,均P＜0.05).在双氢睾酮(DHT)刺激LNCaP-AI细胞后,FN1和ZNF438基因的mRNA及蛋白表达水平分别为0.434±0.050和0.069±0.042,显著低于对照组的1.000±0.016和1.025±0.277;差异有统计学意义(t=18.532、5.905,均P＜0.05).而在慢病毒转染干扰LNCaP-AI细胞AR的表达后,FN1和ZNF438基因的mRNA及蛋白表达水平分别为17.579±4.415和1.895±0.424,显著高于对照组的1.028±0.445和1.041 ±0.190;差异有统计学意义(=6.461、3.184,均P＜0.05).结论 FN1和ZNF438为雄激素非依赖性前列腺癌LNCaP-AI细胞雄激素受体负向调节的靶基因,可为进一步研究雄

作者：俞攀；尹彬彬；刘春华；程玥；刘伟伟；段秀枝；廖昭平；陈玉华；王旭楚

来源：中华医学杂志 2015 年 95卷 48期