目的 探讨Wnt/β-连环素(β-catenin)和细胞外调节蛋白激酶/丝裂原活化蛋白激酶(ERK/MAPK)信号通路在脑源性神经营养因子(BDNF)促进诱导多能干细胞(iPSCs)分化为神经干细胞(NSCs)中的作用及相关机制.方法 iPSCs传代培养、鉴定,BDNF和维甲酸(RA)诱导iPSCs分化为NSCs,流式细胞仪检测巢蛋白(Nestin)阳性细胞率.应用小分子RNA干扰技术(siRNA)分别沉默β-catenin及ERK1/2基因,并将iPSCs分为BDNF组(添加10 μg/L BDNF)、siRNA-ERK/BDNF组(转染siRNA-ERK并添加10 μg/L BDNF)、siRNA-β-catenin/BDNF组(转染siRNA-β-catenin 并添加10 μg/L BDNF)及空白对照组分化培养,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blotting法检测各组Wnt/β-catenin和ERK/MAPK信号通路关键因子β-catenin、ERK1/2及下游转录因子c-fos、c-jun、c-myc的表达.组间两两比较用最小差值显著法进行分析.结果 免疫荧光染色显示iPSCs表达八聚体转录因子(Oct4)、胚胎干细胞转录蛋白(Sox2)及干细胞关键蛋白Nanog等多潜能标志物.流式细胞仪检测显示BDNF诱导iPSCs分化为NSCs的Nestin阳性细胞率为78.7
作者：陈双庆；黄敏；刘晨鹭；沈玉英；蔡庆；王培军
来源：中华医学杂志 2017 年 97卷 41期
