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目的 观察浅低温联合硫化氢对全脑缺血再灌注(I/R)损伤后海马内质网应激(ERS)的影响.方法 清洁级健康雄性SD大鼠60只,8~10周龄,体质量280~320 g,采用随机数字表法分为5组(n=12):假手术组(Sham组)、全脑缺血再灌注组(I/R组)、硫化氢组(H2S组)、浅低温组(MH组)、硫化氢+浅低温组(H2 S+MH组).采用经食管心脏起搏法诱发心跳骤停并行心肺复苏制备大鼠全脑缺血再灌注损伤模型.硫氢化钠(NaHS)的给药方案:于自主循环恢复即刻腹腔注射硫氢化钠2.5 mg/kg;浅低温的实施:于自主循环恢复即刻用乙醇擦拭大鼠体表,配合冰袋15 min内将直肠温度降至32~34℃,维持6 h.于再灌注72 h时行神经功能缺陷评分(NDS),处死大鼠后取海马组织,采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)和Caspase-12的表达;于再灌注72 h时取海马组织,行HE染色,光镜下观察海马CA1区病理学结果;采用原位DNA末端转移酶法(TUNEL)染色检测海马CA1区细胞凋亡情况,计算细胞凋亡指数(AI).结果 全脑缺血再灌注损伤可诱导内质网应激标志蛋白GRP78、CHOP和Caspase-12的表达显著增高,提示严重的内质网应激被激活.Sham组、I/R组、H2 S组、MH组、H2 S+MH组的GRP78含量分别为0.11±0.03、1.11±0.10、0.67±0.09、0

作者:操良斌;桂勤芳;陈泳伊;李娟;周洁洁;王强;段满林;徐建国

来源:中华医学杂志 2018 年 98卷 44期

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作者:
操良斌;桂勤芳;陈泳伊;李娟;周洁洁;王强;段满林;徐建国
来源:
中华医学杂志 2018 年 98卷 44期
标签:
浅低温 硫化氢 再灌注损伤,脑 内质网应激 Mild hypothermia Hydrogen sulfide Reperfusion injury,brain Endoplasmic reticulum stress
目的 观察浅低温联合硫化氢对全脑缺血再灌注(I/R)损伤后海马内质网应激(ERS)的影响.方法 清洁级健康雄性SD大鼠60只,8~10周龄,体质量280~320 g,采用随机数字表法分为5组(n=12):假手术组(Sham组)、全脑缺血再灌注组(I/R组)、硫化氢组(H2S组)、浅低温组(MH组)、硫化氢+浅低温组(H2 S+MH组).采用经食管心脏起搏法诱发心跳骤停并行心肺复苏制备大鼠全脑缺血再灌注损伤模型.硫氢化钠(NaHS)的给药方案:于自主循环恢复即刻腹腔注射硫氢化钠2.5 mg/kg;浅低温的实施:于自主循环恢复即刻用乙醇擦拭大鼠体表,配合冰袋15 min内将直肠温度降至32~34℃,维持6 h.于再灌注72 h时行神经功能缺陷评分(NDS),处死大鼠后取海马组织,采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)和Caspase-12的表达;于再灌注72 h时取海马组织,行HE染色,光镜下观察海马CA1区病理学结果;采用原位DNA末端转移酶法(TUNEL)染色检测海马CA1区细胞凋亡情况,计算细胞凋亡指数(AI).结果 全脑缺血再灌注损伤可诱导内质网应激标志蛋白GRP78、CHOP和Caspase-12的表达显著增高,提示严重的内质网应激被激活.Sham组、I/R组、H2 S组、MH组、H2 S+MH组的GRP78含量分别为0.11±0.03、1.11±0.10、0.67±0.09、0