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目的比较携带小鼠IL-12基因的增殖型腺病毒(CNHK200-mIL12)和非增殖型腺病毒(Adv-mIL12)对IL-12基因的表达以及对肝癌细胞的杀伤能力.方法通过MTT以及病毒增殖实验,评估E1B-55 000缺陷的增殖型腺病毒CNHK200-mIL12和ONYX-015(dl1520),以及非增殖型腺病毒Adv-mIL12对人正常肝细胞株LO2、人肝癌细胞株HepG2和Hep3B的杀伤能力.采用蛋白质印迹分析和ELISA法,检测CNHK200-mIL12和Adv-mIL12感染HepG2和Hep3B细胞后,小鼠IL-12基因的表达情况.结果 CNHK200-mIL12感染HepG2和Hep3B细胞后大量增殖,在感染后96h时检测,分别增殖3160倍和630倍,在极低的MOI(空斑形成单位/细胞)值和极短的时间内(HepG2细胞:MOI=0.2,第4天;Hep3B细胞:MOI=0.005,第2天),可大量杀伤肿瘤细胞,而对LO2细胞无明显杀伤.CNHK200-mIL12和Adv-mIL12感染HepG2细胞后,其IL-12基因表达量,前者是后者的101倍;感染Hep3B细胞后,前者是后者的20倍.结论增殖型腺病毒载体对肿瘤细胞的杀伤能力和目的基因的表达,明显优于传统的非增殖型腺病毒载体,应用前景广阔.

作者:王星华;杨甲梅;崔贞福;王伟国;吴孟超;钱其军

来源:中华肿瘤杂志 2004 年 26卷 10期

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作者:
王星华;杨甲梅;崔贞福;王伟国;吴孟超;钱其军
来源:
中华肿瘤杂志 2004 年 26卷 10期
标签:
基因治疗 腺病毒载体 白细胞介素12 肝肿瘤 癌,肝细胞
目的比较携带小鼠IL-12基因的增殖型腺病毒(CNHK200-mIL12)和非增殖型腺病毒(Adv-mIL12)对IL-12基因的表达以及对肝癌细胞的杀伤能力.方法通过MTT以及病毒增殖实验,评估E1B-55 000缺陷的增殖型腺病毒CNHK200-mIL12和ONYX-015(dl1520),以及非增殖型腺病毒Adv-mIL12对人正常肝细胞株LO2、人肝癌细胞株HepG2和Hep3B的杀伤能力.采用蛋白质印迹分析和ELISA法,检测CNHK200-mIL12和Adv-mIL12感染HepG2和Hep3B细胞后,小鼠IL-12基因的表达情况.结果 CNHK200-mIL12感染HepG2和Hep3B细胞后大量增殖,在感染后96h时检测,分别增殖3160倍和630倍,在极低的MOI(空斑形成单位/细胞)值和极短的时间内(HepG2细胞:MOI=0.2,第4天;Hep3B细胞:MOI=0.005,第2天),可大量杀伤肿瘤细胞,而对LO2细胞无明显杀伤.CNHK200-mIL12和Adv-mIL12感染HepG2细胞后,其IL-12基因表达量,前者是后者的101倍;感染Hep3B细胞后,前者是后者的20倍.结论增殖型腺病毒载体对肿瘤细胞的杀伤能力和目的基因的表达,明显优于传统的非增殖型腺病毒载体,应用前景广阔.