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目的 筛选、克隆与鉴定人子宫内膜癌发病特异相关的基因片段,探索子宫内膜癌发生的分子机制.方法 运用激光捕获显微切割技术(LCM)获取无间质混杂的人正常子宫内膜腺管上皮细胞与子宫内膜癌细胞,提取微量RNA并进行纯化及浓缩,采用荧光差异显示技术(FDD-PCR)筛选与子宫内膜癌发病特异相关的差异基因片段,反向Northern点杂交(使用扩增的RNA)验证差异片段,对阳性片段利用GenBank进行BLAST比对分析.结果 共获得38条差异条带,其中3条在正常子宫内膜中高表达,35条在子宫内膜癌中高表达.对10条再回收差异条带进行克隆并测序,经反向Northern点杂交鉴定,获得6条阳性差异基因片段.经BLAST比对分析显示,L1.1与细胞周期蛋白依赖性激酶7(CDK7)同源性为99

作者:刘文欣;郝希山

来源:中华肿瘤杂志 2007 年 29卷 8期

知识库介绍

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作者:
刘文欣;郝希山
来源:
中华肿瘤杂志 2007 年 29卷 8期
标签:
子宫内膜肿瘤 基因,肿瘤抑制
目的 筛选、克隆与鉴定人子宫内膜癌发病特异相关的基因片段,探索子宫内膜癌发生的分子机制.方法 运用激光捕获显微切割技术(LCM)获取无间质混杂的人正常子宫内膜腺管上皮细胞与子宫内膜癌细胞,提取微量RNA并进行纯化及浓缩,采用荧光差异显示技术(FDD-PCR)筛选与子宫内膜癌发病特异相关的差异基因片段,反向Northern点杂交(使用扩增的RNA)验证差异片段,对阳性片段利用GenBank进行BLAST比对分析.结果 共获得38条差异条带,其中3条在正常子宫内膜中高表达,35条在子宫内膜癌中高表达.对10条再回收差异条带进行克隆并测序,经反向Northern点杂交鉴定,获得6条阳性差异基因片段.经BLAST比对分析显示,L1.1与细胞周期蛋白依赖性激酶7(CDK7)同源性为99