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目的 探讨EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白1(LMP-1)对鼻咽癌细胞在体内增殖和转移能力的影响及其可能的机制.方法 构建重组腺相关病毒(Raav)-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和Raav-shRNA-LMP-1载体.以不同滴度的Raav-EGFP转染鼻咽癌C666-1细胞,确定最佳转染复数(MOI).Raav-shRNA-LMP-1按MOI转染C666-1细胞,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定抑制效率.将体外转染RNA干扰后的C666-1细胞注入裸鼠肝脏包膜下建立鼻咽痛移植瘤模型,观察裸鼠的肝脏成瘤及肝脏、肺脏转移情况.采用免疫组化法检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达,分析LMP-1基因沉默对鼻咽癌细胞成瘤和转移能力的影响及机制.结果 Raav-EGFP以5×104病毒基因组数/细胞转染C666-1细胞,转染效率>95

作者:刘雄;李刚;张宝;王路;李晓华;李湘平

来源:中华肿瘤杂志 2009 年 31卷 5期

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作者:
刘雄;李刚;张宝;王路;李晓华;李湘平
来源:
中华肿瘤杂志 2009 年 31卷 5期
标签:
鼻咽肿瘤 重组腺相关病毒 RNA干扰 潜伏膜蛋白1 肿瘤转移 Nasopharyngeal neoplasms Recombinant adeno-associated virus RNA interference Latent membrane protein 1 Neoplasm metastasis
目的 探讨EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白1(LMP-1)对鼻咽癌细胞在体内增殖和转移能力的影响及其可能的机制.方法 构建重组腺相关病毒(Raav)-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和Raav-shRNA-LMP-1载体.以不同滴度的Raav-EGFP转染鼻咽癌C666-1细胞,确定最佳转染复数(MOI).Raav-shRNA-LMP-1按MOI转染C666-1细胞,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定抑制效率.将体外转染RNA干扰后的C666-1细胞注入裸鼠肝脏包膜下建立鼻咽痛移植瘤模型,观察裸鼠的肝脏成瘤及肝脏、肺脏转移情况.采用免疫组化法检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达,分析LMP-1基因沉默对鼻咽癌细胞成瘤和转移能力的影响及机制.结果 Raav-EGFP以5×104病毒基因组数/细胞转染C666-1细胞,转染效率>95