目的 研究吉西他滨(Gem)耐药的A549和NCI-H460细胞中胞啶脱酰氨酶(CDA)、核糖核苷酸还原酶M1亚单位(RRMl)、10q丢失的与张力蛋白同源的磷酸酶基因(PTEN)、切除修复交叉互补基因1(ERCC1)和脱氧胞苷酸酶(dCK)的表达以及RRMl(-)37A/C基因多态性.方法 采用药物临床血浆峰浓度冲击与逐步增加剂量相结合的诱导方法,成功诱导抗Gem的细胞系A549/Gem和NCI-H460/Gem.在药物诱导前、诱导过程中和诱导成功后,采用实时荧光定量PCR法检测其CDA、RRM1、PTEN、ERCC1和dCKmRNA的表达,并对其RRM1(-)37位点进行基因分型.结果 A549/Gem和NCI-H460/Gem细胞在药物诱导过程中,耐药指数(RI)随诱导时间的延长分别升至163.228和181.684.但达到一定峰值后逐渐降低,直至产生稳定的耐药性,RI分别为115.297和129.783.RRM1、PTEN、ERCC1和CDA mRNA表达量随着对Gem耐受程度的变化增高和降低,而dCK mRNA表达变化不明显.RRM1(-)37等位基因野生型引物能扩增出诱导各阶段A549/Gem和NCI-H460/Gem细胞的基因组DNA,而突变型引物则不能,说明A549/Gem和NCI-H460/Gem细胞目前的基因型与其亲代细胞一样,仍均为野生型.结论 与亲代细胞比较,A549/Gem和NCI-H460/Gem细胞的CDA、RRM1、PTEN和ERCC1表达升高,dCK表达变化不明显;RRM1(-)37位点单核苷酸无突变

作者：刘晓晴；王伟霞；林莉；宋三泰

来源：中华肿瘤杂志 2010 年 32卷 1期