目的 在原核表达系统高效表达人乳头瘤病毒(HPV) 16型L2N120E7E6融合蛋白,获得具有高表达水平和强免疫原性的HPV治疗性融合蛋白疫苗.方法 利用重叠PCR方法构建经密码子优化的HPV16L2N120E7E6融合基因,然后将其插入pET9a原核表达载体中,采用Western blot 法对表达蛋白进行鉴定.对HPV16L2N120E7E6融合蛋白免疫的小鼠进行特异性抗体和细胞免疫反应的检测,评价其对肿瘤生长的抑制作用.结果 密码子优化的HPV16L2N120E7E6基因能在原核表达载体pET9a中高效表达,表达水平约占全菌蛋白的48.6％.HPV16L2N120E7E6融合蛋白免疫的小鼠可检测到针对L2、E7和E6的高滴度抗体,抗体滴度分别为1:40317、1:16000和1:800.CPG1826佐剂和HPV16L2N120E7E6融合蛋白免疫小鼠后,可产生较强的针对HPV16E749-57肽特异性T细胞免疫反应和较弱的E6特异性T细胞免疫反应,其分泌γ-干扰素的效应T细胞斑点数分别为(464.00±35.52)个和(47.00±11.67)个.HPV16L2N120E7E6融合蛋白对小鼠移植瘤生长有明显的抑制作用,有80.0％(8/10)的小鼠不成瘤.结论 HPV16L2N120E7E6融合蛋白可作为治疗HPV16慢性感染和宫颈癌手术后辅助治疗的候选疫苗.
作者：赵莉；高孟；高见；任皎；张卉；田厚文；谭文杰；阮力
来源：中华肿瘤杂志 2012 年 34卷 11期
