目的 探讨高转移性人卵巢癌细胞HO8910PM特异性结合短肽对卵巢癌生物学行为的影响.方法 以HO8910PM细胞为靶细胞,人正常卵巢上皮7311细胞和卵巢癌HO8910细胞为吸附细胞,用噬菌体环七肽库进行4轮差减筛选.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光染色法对阳性噬菌体克隆进行鉴定.建立特异性短肽裸鼠腹腔移植瘤模型,分析其对裸鼠成瘤能力及侵袭、转移能力的影响.采用免疫组化法检测血管内皮生长因子(VEGF)的表达,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测肿瘤细胞凋亡指数(AI).结果 经过4轮筛选后,噬菌体在HO8910PM细胞上出现了明显的富集现象.ELISA结果显示,在随机挑选的20个噬菌体克隆中,有12个可与HO8910PM细胞特异性结合.细胞免疫荧光显示,筛选的阳性噬菌体克隆能与HO8910PM细胞特异性结合.黏附实验结果显示,HO8910PM-peptide20组、HO8910PM-peptide16组和HO8910PM组的细胞黏附率分别为49.0%、96.8%和100.0%,HO8910PM-peptide20组与HO8910PM组的细胞黏附率差异有统计学意义(P<0.05),合成的特异性短肽序列peptide20(THRVHLH)能明显抑制HO8910PM细胞的黏附能力.裸鼠体内实验显示,peptide20能够有效地抑制肿瘤的生长和转移,实验组、阴性对照组和空白组裸鼠移植瘤组织中VEGF蛋白的阳性表达率分别为21.2%、81.
作者:周聪;康佳丽;王小霞;聂妙玲;蒋文燕
来源:中华肿瘤杂志 2014 年 36卷 8期