目的:探讨非小细胞肺癌细胞在二维和三维培养条件下的生物学行为差异。方法选用琼脂和海藻酸钠材料,利用三维(3D)打印技术制备细胞支架,并与肺癌95D细胞共培养,利用光学显微镜、电子显微镜、HE染色、四甲基偶氮唑蓝比色法、Western blot等方法研究三维细胞培养条件下细胞形态、增殖能力、蛋白表达等方面与二维细胞培养条件的差异。结果二维培养细胞呈长梭形、多角形,三维培养细胞聚集成球,细胞球向周围或支架内部浸润、迁移、播散。培养2~6 d,二维培养组细胞的增殖能力明显高于三维培养组;培养8~9 d,二维培养组细胞的增殖能力低于三维培养组。二维培养组p53、Cdc42和mTOR蛋白的表达水平为3.063±0.139、1.738±0.122和2.472±0.151,高于三维培养组(分别为0.529±0.103、0.820±0.038和1.967±0.066),差异均有统计学意义(均P<0.05);二维培养组基质金属蛋白酶2蛋白的表达水平为0.017±0.001,低于三维培养组(1.110±0.029),差异有统计学意义( P<0.05)。结论三维培养肺癌细胞在形态学、增殖能力、蛋白表达等方面与二维培养细胞差异明显,3D打印琼脂和海藻酸钠支架能更好地模拟体内肺癌生长的微环境,可作为肺癌体外模型用于基础研究。
作者:牟好;王剑;胡慧珍;徐炜;陈清勇
来源:中华肿瘤杂志 2015 年 10期