目的：利用制备血液制品中滤除的白细胞，体外诱导扩增自然杀伤细胞（NK），并对NK 细胞的分离培养方法进行优化。方法收集15例健康献血者的新鲜外周血，将制备血液制品中滤除的白细胞回收，经密度梯度离心法获得外周血单个核细胞（PBMCs），每份样本分为 CD3mAb 组（包被 CD3单克隆抗体）、CD16mAb 组（包被 CD16单克隆抗体）和 CD16mAb＋CD3mAb 组（包被 CD16单克隆抗体和 CD3单克隆抗体）。相同培养条件下，加入相同无血清细胞培养液和细胞因子培养、诱导扩增。在显微镜下观察细胞扩增倍数，采用流式细胞术检测细胞表型 CD3－CD56＋细胞比例、NK 细胞表面活化性受体的表达及细胞杀伤因子干扰素γ（IFN－γ）的分泌，采用乳酸脱氢酶（LDH）释放法及流式细胞术检测 NK 细胞对肿瘤细胞的细胞毒作用。结果培养第17天，CD3mAb 组、CD16mAb 组和 CD16mAb＋CD3mAb 组的 CD3－CD56＋细胞比例分别为（15．19±12．22）％、（83．63±10．63）％和（49．40±12．64）％，而培养前 CD3－CD56＋细胞比例为（16．34±10．51）％。 CD16mAb 组和 CD16mAb＋CD3mAb 组CD3－CD56＋细胞比例与 CD3mAb 组 CD3－CD56＋细胞比例比较，差异有统计学意义（ P ＜0．05）。CD3mAb 组、CD16mAb 组和 CD16mAb＋CD3mAb 组的 NK 细

作者：靳保利；郭继强；韩亚萍；李芳；赵晴；李文丽；张德梅；王华；张俊萍

来源：中华肿瘤杂志 2016 年 38卷 2期