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目的:探讨肿瘤转移相关基因1(MTA1)对宫颈癌HeLa细胞放疗敏感性的影响及其分子机制。方法:对MTA1敲降的HeLa细胞及对照HeLa细胞进行转录测序,获得差异表达基因并对其进行基因集富集分析和GO聚类分析。采用流式细胞术检测MTA1过表达的HeLa细胞和对照HeLa细胞在10 Gy X射线照射前后的细胞凋亡情况,克隆形成实验和实时无标记动态细胞分析(RTCA)技术检测细胞的增殖情况。选取差异表达基因编码的蛋白构建蛋白相互作用网络,采用免疫荧光实验检测γ-H2AX的表达情况,采用Western blot法检测γ-H2AX、β-CHK2、PARP和cleaved caspase 3的表达水平。结果:转录组测序分析获得差异表达基因649个,其中402个基因在MTA1敲降的HeLa细胞中表达上调,247个基因表达下调。与MTA1相关的差异表达基因富集于DNA损伤修复过程,GO聚类分析提示,DNA损伤修复富集于第2位。流式细胞术检测结果显示,10 Gy X射线照射后,MTA1过表达的HeLa细胞凋亡率[(15.67±0.81)

作者:孙芳洲;王劲松;李春晓;王婷;张竞尧;周彦彤;王海娟;钱海利

来源:中华肿瘤杂志 2022 年 44卷 9期

知识库介绍

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作者:
孙芳洲;王劲松;李春晓;王婷;张竞尧;周彦彤;王海娟;钱海利
来源:
中华肿瘤杂志 2022 年 44卷 9期
标签:
宫颈肿瘤 HeLa细胞 肿瘤转移相关基因1 放疗敏感性 Cervical neoplasms HeLa cells MTA1 Radiosensitivity
目的:探讨肿瘤转移相关基因1(MTA1)对宫颈癌HeLa细胞放疗敏感性的影响及其分子机制。方法:对MTA1敲降的HeLa细胞及对照HeLa细胞进行转录测序,获得差异表达基因并对其进行基因集富集分析和GO聚类分析。采用流式细胞术检测MTA1过表达的HeLa细胞和对照HeLa细胞在10 Gy X射线照射前后的细胞凋亡情况,克隆形成实验和实时无标记动态细胞分析(RTCA)技术检测细胞的增殖情况。选取差异表达基因编码的蛋白构建蛋白相互作用网络,采用免疫荧光实验检测γ-H2AX的表达情况,采用Western blot法检测γ-H2AX、β-CHK2、PARP和cleaved caspase 3的表达水平。结果:转录组测序分析获得差异表达基因649个,其中402个基因在MTA1敲降的HeLa细胞中表达上调,247个基因表达下调。与MTA1相关的差异表达基因富集于DNA损伤修复过程,GO聚类分析提示,DNA损伤修复富集于第2位。流式细胞术检测结果显示,10 Gy X射线照射后,MTA1过表达的HeLa细胞凋亡率[(15.67±0.81)