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目的 构建AQP5的重组腺病毒载体,并验证其在干燥综合征中的治疗作用.方法 采用RT-PCR方法扩增AQP5基因,经酶切插入穿梭质粒pAdTrack-CMV,形成重组质粒pAdTrack-CMV-AQP5.经Pmel酶切线性化后与pAdeasy-1同源重组,重组质粒pAdeasy-AQP5经Pacl酶切,经脂质体转染入HEK293细胞中包装获得病毒.经过体外检测确认病毒表达后,于NOD小鼠颌下腺周注射病毒,观察其对唾液分泌量的影响.结果 经PCR和测序证实重组pAdeasy-AQP5质粒构建成功.并可见其在293细胞中表达;初步实验研究发现,其能缓解NOD小鼠的唾液腺分泌功能异常.结论 成功构建了AQP5的重组腺病毒载体,初步证实了pAdeasy-AQP5在干燥综合征中的治疗作用.
作者：王梁；李幼华；蔡雅卫
来源：浙江医学 2010 年 32卷 9期
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