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目的 探讨姜黄素衍生物通过Notch1/发状分裂相关增强子1(Notch1/Hes1)信号通路对呼吸道合胞病毒(RSV)感染后人肺上皮细胞BEAS-2b黏蛋白5AC(MUC5AC)分泌的影响及其作用机制.方法 建立体外RSV感染细胞模型,随机分成6组:姜黄素衍生物B6组、γ分泌酶抑制剂(DAPT)+B6组、DAPT组、地塞米松(DXM)组、RSV组和细胞对照组.B6组在RSV感染造模0.5 h前予10滋mol/L B6预处理,DAPT+B6组在B6预处理前先以20滋mol/L DAPT预处理1 h.造模开始前1 h,DXM组加入0.01 mg/ml DXM.B6组、DAPT+B6组、DAPT组、DXM组及RSV组以100倍半数感染量(TCID50)浓度的RSV感染吸附2 h后加维持液培养12、24 h收获细胞及上清液进行检测.应用RT-PCR、Western blot法分别检测各组细胞Notch1、Hes1、MUC5AC mRNA与蛋白质的表达;ELISA法检测上清液中IL-25蛋白水平.结果 与细胞对照组相比,B6组、DAPT+B6组、DAPT组、RSV组Notch1、Hes1、MUC5AC mRNA和蛋白表达水平及IL-25蛋白水平在12、24 h两个时间点均显著升高(均P<0.05),其中MUC5AC表达水平在24 h升高更显著.与RSV组相比,两个时间点其他组上述指标表达水平均有所降低(均P<0.05),以DXM组表达水平最低;而B6组、DAPT+B6组、DAPT组同一时间点上述指标表达水平相近.结论 RSV感染人肺上皮细胞后,通过Notch1/

作者:叶文静;翁婷婷;王乐颖;李海燕;陈小芳;董琳

来源:浙江医学 2021 年 43卷 15期

知识库介绍

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作者:
叶文静;翁婷婷;王乐颖;李海燕;陈小芳;董琳
来源:
浙江医学 2021 年 43卷 15期
标签:
呼吸道合胞病毒 黏蛋白5AC Notch1/Hes1信号通路 白介素-25 姜黄素衍生物
目的 探讨姜黄素衍生物通过Notch1/发状分裂相关增强子1(Notch1/Hes1)信号通路对呼吸道合胞病毒(RSV)感染后人肺上皮细胞BEAS-2b黏蛋白5AC(MUC5AC)分泌的影响及其作用机制.方法 建立体外RSV感染细胞模型,随机分成6组:姜黄素衍生物B6组、γ分泌酶抑制剂(DAPT)+B6组、DAPT组、地塞米松(DXM)组、RSV组和细胞对照组.B6组在RSV感染造模0.5 h前予10滋mol/L B6预处理,DAPT+B6组在B6预处理前先以20滋mol/L DAPT预处理1 h.造模开始前1 h,DXM组加入0.01 mg/ml DXM.B6组、DAPT+B6组、DAPT组、DXM组及RSV组以100倍半数感染量(TCID50)浓度的RSV感染吸附2 h后加维持液培养12、24 h收获细胞及上清液进行检测.应用RT-PCR、Western blot法分别检测各组细胞Notch1、Hes1、MUC5AC mRNA与蛋白质的表达;ELISA法检测上清液中IL-25蛋白水平.结果 与细胞对照组相比,B6组、DAPT+B6组、DAPT组、RSV组Notch1、Hes1、MUC5AC mRNA和蛋白表达水平及IL-25蛋白水平在12、24 h两个时间点均显著升高(均P<0.05),其中MUC5AC表达水平在24 h升高更显著.与RSV组相比,两个时间点其他组上述指标表达水平均有所降低(均P<0.05),以DXM组表达水平最低;而B6组、DAPT+B6组、DAPT组同一时间点上述指标表达水平相近.结论 RSV感染人肺上皮细胞后,通过Notch1/