目的 探讨胆固醇25-羟化酶(CH25H)通过调控细胞自噬和凋亡对喉鳞状细胞癌(LSCC)进展的影响.方法 通过转染CH25H过表达质粒,构建CH25H稳定过表达的人LSCC细胞系AMC-HN-8细胞(AMC-HN-8/CH25H),转染空白质粒为转染对照(AMC-HN-8/Mock),同时设置未转染空白对照(AMC-HN-8).采用实时荧光定量PCR检测各组细胞CH25H mRNA表达水平,Western bolt检测CH25H、凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)、裂解的半胱氨酸蛋白酶-3(C-caspase-3)]、自噬相关蛋白[微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)Ⅱ、Beclin-1、p62]以及磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路蛋白[PI3K、磷酸化PI3K(p-PI3K)、Akt、磷酸化Akt(p-Akt)]的表达水平.流式细胞术检测各组细胞凋亡率,免疫荧光检测各组细胞LC3 Ⅱ表达.构建裸鼠LSCC移植瘤动物模型,采用随机数字表法将裸鼠分为AMC-HN-8组、AMC-HN-8/Mock组、AMC-HN-8/CH25H组,每组8只,分别接种对应细胞,检测CH25H对LSCC细胞生长以及凋亡相关蛋白和自噬相关蛋白的影响.结果 相比AMC-HN-8和AMC-HN-8/Mock组细胞,AMC-HN-8/CH25H组细胞CH25H表达上调(P＜0.05),凋亡率显著增加(P＜0.05),CH25H表达促进了 Bax和C-caspase-3表达,抑制了 Bcl-2的表达.同时CH25H表达促进了 LC3 Ⅱ和Beclin-1

作者：熊华才；许雨欣；邬振华；胡丹飞；李群；项振飞

来源：浙江医学 2024 年 46卷 8期