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目的:构建小鼠secretedfrizzled-related protein-2(SFRP-2)全基因的重组腺病毒表达系统.方法:采用基因工程技术,将SFRP-2基因片段克隆入穿梭质粒pAdTrack-CMV,然后在细菌内与pAdEasy-1进行同源重组,经脂质体转染293细胞包装并扩增腺病毒颗粒.体外原代培养小鼠子宫内膜基质细胞,转染制备的腺病毒颗粒,并用Western blot法检测SFRP-2蛋白的表达.结果:构建的小鼠SFRP-2重组腺病毒载体的效价达到5.6×1012 pfu/mL,转染原代培养的小鼠子宫内膜基质细胞48 h后,有SFRP-2蛋白的明显表达.结论:成功构建含小鼠SFRP-2全基因的重组腺病毒载体.

作者:谭毅;谭冬梅;何明忠;王立芝;后晓南

来源:肿瘤 2006 年 26卷 2期

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作者:
谭毅;谭冬梅;何明忠;王立芝;后晓南
来源:
肿瘤 2006 年 26卷 2期
标签:
基因,SFRP-2 腺病毒属 遗传载体/生物合成 转染 间质细胞 细胞,培养的
目的:构建小鼠secretedfrizzled-related protein-2(SFRP-2)全基因的重组腺病毒表达系统.方法:采用基因工程技术,将SFRP-2基因片段克隆入穿梭质粒pAdTrack-CMV,然后在细菌内与pAdEasy-1进行同源重组,经脂质体转染293细胞包装并扩增腺病毒颗粒.体外原代培养小鼠子宫内膜基质细胞,转染制备的腺病毒颗粒,并用Western blot法检测SFRP-2蛋白的表达.结果:构建的小鼠SFRP-2重组腺病毒载体的效价达到5.6×1012 pfu/mL,转染原代培养的小鼠子宫内膜基质细胞48 h后,有SFRP-2蛋白的明显表达.结论:成功构建含小鼠SFRP-2全基因的重组腺病毒载体.