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目的:探讨羧基端缺失了30个氨基酸的乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)突变体△HBx和野生型HBx对肝癌细胞Huh7生物学行为的影响.方法:脂质体介导pcDNA3△HBx和pcDNA3HBx重组体转染人HBV(一)的肝癌细胞Huh7.PCR扩增Neo基因及Western blot检测转染重组体.运用细胞生长曲线绘制、平板克隆形成、流式细胞仪和裸鼠成瘤实验对转染pcDNA3△HBx、pcDNA3HBx和pcDNA3的细胞生物学活性进行检测.结果:pcDNA3△HBx组细胞生长速度较pcDNA3HBx组和pcDNA3组减慢,其倍增时间延长;pcDNA3△HBx组克隆形成率较pcDNA3HBx组和pcDNA3组下降;细胞周期检测显示pcDNA3△HBx表达使Huh7细胞G0/G1期→S期的进程明显减慢.结论:HBx羧基端缺失了30个氨基酸的突变体比野生型HBx具有明显抑制细胞增殖的能力,提示该区域对于HBx功能发挥起着至关重要的作用.

作者:刘晓红;朱明华;曹晓哲;郑建明;陈颖

来源:肿瘤 2006 年 26卷 3期

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作者:
刘晓红;朱明华;曹晓哲;郑建明;陈颖
来源:
肿瘤 2006 年 26卷 3期
标签:
癌,肝细胞 肝炎病毒,乙型 突变/遗传学 Huh7细胞
目的:探讨羧基端缺失了30个氨基酸的乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)突变体△HBx和野生型HBx对肝癌细胞Huh7生物学行为的影响.方法:脂质体介导pcDNA3△HBx和pcDNA3HBx重组体转染人HBV(一)的肝癌细胞Huh7.PCR扩增Neo基因及Western blot检测转染重组体.运用细胞生长曲线绘制、平板克隆形成、流式细胞仪和裸鼠成瘤实验对转染pcDNA3△HBx、pcDNA3HBx和pcDNA3的细胞生物学活性进行检测.结果:pcDNA3△HBx组细胞生长速度较pcDNA3HBx组和pcDNA3组减慢,其倍增时间延长;pcDNA3△HBx组克隆形成率较pcDNA3HBx组和pcDNA3组下降;细胞周期检测显示pcDNA3△HBx表达使Huh7细胞G0/G1期→S期的进程明显减慢.结论:HBx羧基端缺失了30个氨基酸的突变体比野生型HBx具有明显抑制细胞增殖的能力,提示该区域对于HBx功能发挥起着至关重要的作用.