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目的:探讨WT1基因异构体比例的改变对急性早幼粒细胞性白血病细胞株NB4基因表达谱的影响.方法:用电穿孔法将携带WT1基因异构体WTA(-17AA/-KTS)全长cDNA的重组真核表达载体及其对照质粒pCB6+转染入白血病细胞株NB4,建立WT1基因异构体表达比例改变的单克隆细胞株NB4/WTA.运用cDNA微阵列技术检测WT1基因异构体表达比例的转变对NB4细胞基因表达谱的影响.并用RT-PCR方法验证cyclin A1及CDK7基因表达的改变.结果:转染WT1基因异构体WTA后,外源基因在mRNA及蛋白水平上稳定表达,NB4细胞中共89个细胞周期相关基因、细胞凋亡相关基因、癌基因以及细胞信号和传递蛋白等基因出现2倍以上表达水平的改变.RT-PCR证实与细胞周期相关的cyclinA1基因表达上调,CDK7基因表达下调.结论:WT1基因异构体WTA表达比例增加能引起NB4细胞基因表达谱的改变,这些基因的改变可能对白血病细胞增殖、分化和凋亡等生物学行为产生影响.

作者:沈慧玲;陈子兴;王玮;岑建农;胡绍燕;赵晔

来源:肿瘤 2006 年 26卷 6期

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作者:
沈慧玲;陈子兴;王玮;岑建农;胡绍燕;赵晔
来源:
肿瘤 2006 年 26卷 6期
标签:
白血病,早幼粒细胞,急性 基因,肾母细胞瘤 蛋白质异构体 寡核苷类排列序列分析 NB4细胞
目的:探讨WT1基因异构体比例的改变对急性早幼粒细胞性白血病细胞株NB4基因表达谱的影响.方法:用电穿孔法将携带WT1基因异构体WTA(-17AA/-KTS)全长cDNA的重组真核表达载体及其对照质粒pCB6+转染入白血病细胞株NB4,建立WT1基因异构体表达比例改变的单克隆细胞株NB4/WTA.运用cDNA微阵列技术检测WT1基因异构体表达比例的转变对NB4细胞基因表达谱的影响.并用RT-PCR方法验证cyclin A1及CDK7基因表达的改变.结果:转染WT1基因异构体WTA后,外源基因在mRNA及蛋白水平上稳定表达,NB4细胞中共89个细胞周期相关基因、细胞凋亡相关基因、癌基因以及细胞信号和传递蛋白等基因出现2倍以上表达水平的改变.RT-PCR证实与细胞周期相关的cyclinA1基因表达上调,CDK7基因表达下调.结论:WT1基因异构体WTA表达比例增加能引起NB4细胞基因表达谱的改变,这些基因的改变可能对白血病细胞增殖、分化和凋亡等生物学行为产生影响.