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目的:探讨AKT2基因在肿瘤细胞对紫杉醇敏感性中的作用.方法:分别构建2个针对同一AKT2基因不同位点的短发卡状RNA(shRNA)载体,转染人卵巢癌细胞A2780、SKOV3,荧光显微镜观察细胞内荧光蛋白的表达及转染效率,运用RT-PCR、蛋白质免疫印迹(western blotting)方法比较单独转染的抑制瘤和共转染对AKT2表达的沉默效率;抑制AKT2表达后,流式细胞仪(FACS)检测肿瘤细胞对紫杉醇的敏感性.结果:构建的2种shRNA表达载体均可抑制AKT2mRNA和蛋白的表达,共转染的抑制率明显高于分别单独转染的抑制率(P<0.05);FACS结果显示,共转染沉默AKT2基因后,细胞凋亡率明显增加(P<0.05).结论:共转染针对AKT2基因不同位点的2个shRNA真核表达载体,对AKT2基因的抑制效率高于单独转染1个载体;抑制卵巢癌细胞中AKT2基因表达,能增强其对紫杉醇的敏感性.

作者:宋晓红;邢辉;翁丹卉;马晓黎;卢运萍;周剑锋;马丁

来源:肿瘤 2007 年 27卷 1期

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作者:
宋晓红;邢辉;翁丹卉;马晓黎;卢运萍;周剑锋;马丁
来源:
肿瘤 2007 年 27卷 1期
标签:
卵巢肿瘤 RNA干扰 紫杉醇 细胞凋亡 基因,AKT2 肿瘤细胞,培养的
目的:探讨AKT2基因在肿瘤细胞对紫杉醇敏感性中的作用.方法:分别构建2个针对同一AKT2基因不同位点的短发卡状RNA(shRNA)载体,转染人卵巢癌细胞A2780、SKOV3,荧光显微镜观察细胞内荧光蛋白的表达及转染效率,运用RT-PCR、蛋白质免疫印迹(western blotting)方法比较单独转染的抑制瘤和共转染对AKT2表达的沉默效率;抑制AKT2表达后,流式细胞仪(FACS)检测肿瘤细胞对紫杉醇的敏感性.结果:构建的2种shRNA表达载体均可抑制AKT2mRNA和蛋白的表达,共转染的抑制率明显高于分别单独转染的抑制率(P<0.05);FACS结果显示,共转染沉默AKT2基因后,细胞凋亡率明显增加(P<0.05).结论:共转染针对AKT2基因不同位点的2个shRNA真核表达载体,对AKT2基因的抑制效率高于单独转染1个载体;抑制卵巢癌细胞中AKT2基因表达,能增强其对紫杉醇的敏感性.