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目的:为探索治疗乳腺癌新途径,研究RNA干扰(RNA interferance,RNAi)对MCF-7细胞株WT1基因表达的抑制作用.方法:设计制备多对针对WT 1基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),转染MCF-7细胞,采用实时定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,RQ-PCR)法测定WT1 mRNA的表达,western blot测定WT1蛋白的表达,流式细胞仪检测加入长春新碱后的MCF-7细胞凋亡率.结果:siRNA能有效抑制WT 1基因的表达,但不呈剂量关系,在较低浓度可维持RNAi至少4 d时间,WT 1基因表达下调的MCF-7细胞凋亡率增加.结论:RNAi能有效抑制MCF-7细胞中WT 1基因的表达,同时转染siRNA后细胞对长春新碱敏感.

作者:谷敏;陈子兴;岑建农;何军

来源:肿瘤 2007 年 27卷 1期

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作者:
谷敏;陈子兴;岑建农;何军
来源:
肿瘤 2007 年 27卷 1期
标签:
乳腺肿瘤 RNA,小干扰 基因,肾母细胞瘤 MCF-7细胞
目的:为探索治疗乳腺癌新途径,研究RNA干扰(RNA interferance,RNAi)对MCF-7细胞株WT1基因表达的抑制作用.方法:设计制备多对针对WT 1基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),转染MCF-7细胞,采用实时定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,RQ-PCR)法测定WT1 mRNA的表达,western blot测定WT1蛋白的表达,流式细胞仪检测加入长春新碱后的MCF-7细胞凋亡率.结果:siRNA能有效抑制WT 1基因的表达,但不呈剂量关系,在较低浓度可维持RNAi至少4 d时间,WT 1基因表达下调的MCF-7细胞凋亡率增加.结论:RNAi能有效抑制MCF-7细胞中WT 1基因的表达,同时转染siRNA后细胞对长春新碱敏感.