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目的:探讨羟基喜树碱(HCPT)诱导SMMC-7721细胞凋亡过程中凋亡诱导因子(AIF)不同时相的定位变化和DNA损伤的关系.方法:HCPT作用SMMC-7721细胞后在不同时间点收集细胞,用细胞组分分离试剂盒分离细胞质、线粒体与细胞核成分,用蛋白印迹法与共聚焦显微镜观察AIF的转位,用TUNEL法检测DNA损伤.结果:蛋白印迹结果显示线粒体中AIF在HCPT作用1 h无明显变化,6 h出现了明显转位,在12 h与24 h更明显;共聚焦结果也显示在HCPT作用6 h后,AIF已从线粒体迁出,12 h与24 h后,大部分AIF已从线粒体迁至细胞核;TUNEL法检测结果表明伴随AIF的核迁移,DNA出现了明显的损伤.结论:HCPT作用SMMC-7721细胞后AIF的释放是凋亡的早期改变之一;伴随AIF的核转位,同时出现了DNA损伤.

作者:付玉荣;伊正君;颜玉蓉;邱宗荫

来源:肿瘤 2007 年 27卷 7期

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作者:
付玉荣;伊正君;颜玉蓉;邱宗荫
来源:
肿瘤 2007 年 27卷 7期
标签:
肝肿瘤 生物碱类,喜树碱 凋亡诱导因子 细胞凋亡
目的:探讨羟基喜树碱(HCPT)诱导SMMC-7721细胞凋亡过程中凋亡诱导因子(AIF)不同时相的定位变化和DNA损伤的关系.方法:HCPT作用SMMC-7721细胞后在不同时间点收集细胞,用细胞组分分离试剂盒分离细胞质、线粒体与细胞核成分,用蛋白印迹法与共聚焦显微镜观察AIF的转位,用TUNEL法检测DNA损伤.结果:蛋白印迹结果显示线粒体中AIF在HCPT作用1 h无明显变化,6 h出现了明显转位,在12 h与24 h更明显;共聚焦结果也显示在HCPT作用6 h后,AIF已从线粒体迁出,12 h与24 h后,大部分AIF已从线粒体迁至细胞核;TUNEL法检测结果表明伴随AIF的核迁移,DNA出现了明显的损伤.结论:HCPT作用SMMC-7721细胞后AIF的释放是凋亡的早期改变之一;伴随AIF的核转位,同时出现了DNA损伤.