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目的:探讨可溶性FasL(sFasL)联合survivin RNA干扰对肺腺癌细胞A549增殖和凋亡的影响.方法:构建survivin特异RNA小干扰表达载体,DNA测序,转染A549细胞.G418(geneticin)筛选稳定表达survivin RNA小干扰细胞株,荧光实时定量RT-PCR、免疫印迹 (Western blot)和免疫组化法检测survivin mRNA和蛋白表达.sFasL作用于转染后细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和流式细胞仪检测细胞活性和凋亡率.结果:成功构建survivin-siRNA表达载体,筛选出稳定表达单克隆细胞.Survivin mRNA和蛋白表达分别下降76.4

作者:刘黎明;陈昌杰;陈正徐;胡博;段光军;胡华成

来源:肿瘤 2007 年 27卷 8期

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作者:
刘黎明;陈昌杰;陈正徐;胡博;段光军;胡华成
来源:
肿瘤 2007 年 27卷 8期
标签:
细胞系,肿瘤 RNA干扰 细胞凋亡 Fas配体蛋白
目的:探讨可溶性FasL(sFasL)联合survivin RNA干扰对肺腺癌细胞A549增殖和凋亡的影响.方法:构建survivin特异RNA小干扰表达载体,DNA测序,转染A549细胞.G418(geneticin)筛选稳定表达survivin RNA小干扰细胞株,荧光实时定量RT-PCR、免疫印迹 (Western blot)和免疫组化法检测survivin mRNA和蛋白表达.sFasL作用于转染后细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和流式细胞仪检测细胞活性和凋亡率.结果:成功构建survivin-siRNA表达载体,筛选出稳定表达单克隆细胞.Survivin mRNA和蛋白表达分别下降76.4