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目的:探讨CENP-E(centromere protein E)基因在紫杉醇治疗肿瘤中的作用.方法:构建针对CENP-E基因的特异性短发夹RNA(short hair RNA,shRNA)载体,电转法导入人宫颈癌HeLa细胞,转染48 h后,运用实时荧光定量-PCR(real-time fluorogentic quantitative PCR,RFQ-PCR)、Western印迹法及间接免疫荧光方法评价RNA干扰效果;CENP-E表达下调的HeLa细胞及对照组细胞用不同浓度(1、3、10、30、100、300、1 000和3 000 nmol/L)的紫杉醇处理,MTT法检测细胞增殖情况,FCM法检测细胞凋亡情况.结果:shRNA-CENP-E可有效抑制CENP-E的mRNA、蛋白水平以及内源性表达.MTT结果显示,CENP-E表达下调的细胞在不同浓度紫杉醇作用下的增殖抑制率与对照组相比明显增加(P<0.05),并呈现剂量依赖性;FCM结果显示,下调CENP-E表达后细胞的凋亡率明显增加(P<0.05).结论:下调CENP-E的表达能增强宫颈癌细胞对紫杉醇的敏感性.

作者:李素彦;翁亚光;蔡燕

来源:肿瘤 2009 年 29卷 2期

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作者:
李素彦;翁亚光;蔡燕
来源:
肿瘤 2009 年 29卷 2期
标签:
宫颈肿瘤 RNA,小分子干扰 细胞凋亡 紫杉醇
目的:探讨CENP-E(centromere protein E)基因在紫杉醇治疗肿瘤中的作用.方法:构建针对CENP-E基因的特异性短发夹RNA(short hair RNA,shRNA)载体,电转法导入人宫颈癌HeLa细胞,转染48 h后,运用实时荧光定量-PCR(real-time fluorogentic quantitative PCR,RFQ-PCR)、Western印迹法及间接免疫荧光方法评价RNA干扰效果;CENP-E表达下调的HeLa细胞及对照组细胞用不同浓度(1、3、10、30、100、300、1 000和3 000 nmol/L)的紫杉醇处理,MTT法检测细胞增殖情况,FCM法检测细胞凋亡情况.结果:shRNA-CENP-E可有效抑制CENP-E的mRNA、蛋白水平以及内源性表达.MTT结果显示,CENP-E表达下调的细胞在不同浓度紫杉醇作用下的增殖抑制率与对照组相比明显增加(P<0.05),并呈现剂量依赖性;FCM结果显示,下调CENP-E表达后细胞的凋亡率明显增加(P<0.05).结论:下调CENP-E的表达能增强宫颈癌细胞对紫杉醇的敏感性.