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目的:探讨去甲斑蝥素诱导人食管癌Eca-109细胞的凋亡及其可能的作用机制.方法:去甲斑蝥素作用食管癌Eca-109细胞后,应用MTT法检测其对细胞的生长抑制作用, 透射电子显微镜下观察细胞超微结构的变化,琼脂糖凝胶电泳观察其对细胞凋亡的诱导作用,RT-PCR法检测caspase 8和caspase 3 mRNA的表达,Western 印迹法检测Fas、细胞型含死亡域的Fas结合蛋白样白介素-1β转换酶抑制蛋白(cellular FADD-like interleukin-1β converting enzyme inhibitory protein,c-FLIP) 、caspase 8和caspase 3蛋白的表达.结果:去甲斑蝥素对人食管癌Eca-109细胞具有生长抑制作用,并呈时效和量效依赖关系.电子显微镜下观察发现, 食管癌Eca-109细胞趋于凋亡.DNA琼脂糖凝胶电泳可见典型的DNA梯状条带.RT-PCR检测显示,caspase 8和caspase 3 mRNA的表达水平明显上升 (P<0.01).Western 印迹法检测结果显示,与阴性对照组比较,去甲斑蝥素作用后,食管癌Eca-109细胞中Fas、caspase 3和caspase 8蛋白的表达明显上升(P<0.05),c-FLIP蛋白的表达水平明显下降(P<0.05).结论:去甲斑蝥素能够抑制食管癌Eca-109细胞的生长并诱导其凋亡,其机制可能是通过上调Fas、caspase 8、caspase 3的表达和下调c-FLIP的表达来实现的.

作者:许欣;彭林涛

来源:肿瘤 2010 年 30卷 8期

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作者:
许欣;彭林涛
来源:
肿瘤 2010 年 30卷 8期
标签:
食管肿瘤 细胞凋亡 基因表达调控 去甲斑蝥素 细胞,Eca-109
目的:探讨去甲斑蝥素诱导人食管癌Eca-109细胞的凋亡及其可能的作用机制.方法:去甲斑蝥素作用食管癌Eca-109细胞后,应用MTT法检测其对细胞的生长抑制作用, 透射电子显微镜下观察细胞超微结构的变化,琼脂糖凝胶电泳观察其对细胞凋亡的诱导作用,RT-PCR法检测caspase 8和caspase 3 mRNA的表达,Western 印迹法检测Fas、细胞型含死亡域的Fas结合蛋白样白介素-1β转换酶抑制蛋白(cellular FADD-like interleukin-1β converting enzyme inhibitory protein,c-FLIP) 、caspase 8和caspase 3蛋白的表达.结果:去甲斑蝥素对人食管癌Eca-109细胞具有生长抑制作用,并呈时效和量效依赖关系.电子显微镜下观察发现, 食管癌Eca-109细胞趋于凋亡.DNA琼脂糖凝胶电泳可见典型的DNA梯状条带.RT-PCR检测显示,caspase 8和caspase 3 mRNA的表达水平明显上升 (P<0.01).Western 印迹法检测结果显示,与阴性对照组比较,去甲斑蝥素作用后,食管癌Eca-109细胞中Fas、caspase 3和caspase 8蛋白的表达明显上升(P<0.05),c-FLIP蛋白的表达水平明显下降(P<0.05).结论:去甲斑蝥素能够抑制食管癌Eca-109细胞的生长并诱导其凋亡,其机制可能是通过上调Fas、caspase 8、caspase 3的表达和下调c-FLIP的表达来实现的.