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目的:探讨微小RNA (microRNA,miR)-143对人胰腺癌PANC-1细胞生物学特性的影响.方法:人工合成miR-143的模拟物,并通过LipofectAMINETM2000转染入PANC-1细胞.采用实时荧光定量PCR法检测miR-143的表达水平.采用MTT法和FCM法检测对细胞增殖及凋亡的影响,采用Transwell小室和划痕实验检测对PANC-1细胞迁移能力的影响.构建野生型及突变型转化生长因子β活化激酶1[transforming growth factor (TGF)-β activated kinase 1,TAK1]的3’端非编码区(3’-untranslated region,3’-UTR)双荧光素酶报告载体,检测海肾荧光素酶的相对活性以验证miR-143对TAK1 mRNA的作用靶点.结果:转染miR-143模拟物后,PANC-1细胞中miR-143表达上调,但其细胞增殖及凋亡与转染前的差异无统计学意义(P>0.05).转染miR-143组通过Transwell小室的细胞数明显低于各对照组,划痕实验检测结果显示细胞迁移能力受到抑制(P<0.05).与各对照组相比,共转染野生型TAK1的3’-UTR和miR-143可使海肾荧光素酶相对活性显著降低.结论:miR-143对人胰腺癌PANC-1细胞的迁移能力有抑制作用,TAK1可能是其靶基因之一.

作者:程文捷;唐健;黄凤婷;庄燕妍;陈文博;张世能

来源:肿瘤 2012 年 32卷 11期

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作者:
程文捷;唐健;黄凤婷;庄燕妍;陈文博;张世能
来源:
肿瘤 2012 年 32卷 11期
标签:
胰腺肿瘤 微RNAs 细胞增殖 细胞凋亡 细胞迁移分析 丝裂原激活蛋白激酶类 转化生长因子β活化激酶1
目的:探讨微小RNA (microRNA,miR)-143对人胰腺癌PANC-1细胞生物学特性的影响.方法:人工合成miR-143的模拟物,并通过LipofectAMINETM2000转染入PANC-1细胞.采用实时荧光定量PCR法检测miR-143的表达水平.采用MTT法和FCM法检测对细胞增殖及凋亡的影响,采用Transwell小室和划痕实验检测对PANC-1细胞迁移能力的影响.构建野生型及突变型转化生长因子β活化激酶1[transforming growth factor (TGF)-β activated kinase 1,TAK1]的3’端非编码区(3’-untranslated region,3’-UTR)双荧光素酶报告载体,检测海肾荧光素酶的相对活性以验证miR-143对TAK1 mRNA的作用靶点.结果:转染miR-143模拟物后,PANC-1细胞中miR-143表达上调,但其细胞增殖及凋亡与转染前的差异无统计学意义(P>0.05).转染miR-143组通过Transwell小室的细胞数明显低于各对照组,划痕实验检测结果显示细胞迁移能力受到抑制(P<0.05).与各对照组相比,共转染野生型TAK1的3’-UTR和miR-143可使海肾荧光素酶相对活性显著降低.结论:miR-143对人胰腺癌PANC-1细胞的迁移能力有抑制作用,TAK1可能是其靶基因之一.