目的:通过短发夹RNA (short hairpin RNA,shRNA)干扰精氨酸特异性腺苷二磷酸核糖基化转移酶1(arginine-specific adenosinediphosphate-ribosyltransferase 1,ART1)基因的表达,研究沉默ART1基因对小鼠结肠癌CT26细胞增殖的影响及可能的机制.方法:细胞免疫荧光法检测ART1水平,以证实CT26细胞中有ART1的表达.用ART1-shRNA和阴性对照shRNA (negative control-shRNA,NC-shRNA)慢病毒感染CT26细胞后,分别采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测各组细胞中ART1 mRNA和ART1、RhoA、c-myc及c-fos蛋白的表达；CCK-8(cell counting kit-8)法分析各组细胞增殖情况.结果:CT26细胞中有ART1的表达.ART1-shRNA和NC-shRNA慢病毒成功感染细胞,获得稳定低表达ART1基因的CT26细胞株.与感染NC-shRNA慢病毒和未感染的CT26细胞相比,感染ART1-shRNA慢病毒的CT26细胞中ART1 mRNA表达水平及ART1、RhoA、c-myc和c-fos的蛋白表达水平均显著降低(P＜0.01),而细胞增殖抑制率明显升高(P＜0.01).结论:干扰ART1表达可抑制CT26细胞增殖,提示ART1在肿瘤生长、增殖过程中发挥重要作用,其机制可能与ART1基因沉默后RhoA及其下游因子c-myc和c-fos的表达被抑制有关.

作者：徐剑侠；王娅兰；唐怡；熊薇

来源：肿瘤 2012 年 32卷 12期