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目的 检测胃癌细胞中SHP1基因启动子区CpG岛异常甲基化状态.方法 使用甲基化分析软件Cpgplot预测SHP1基因转录起始位点-1 000 bp～1 340 bp区域的CpG岛并用MethPrimer软件设计甲基化特异性PCR(MSP)引物;建立一种基于Bisulfite修饰、无需提取DNA而直接检测少量细胞甲基化的新方法,并将其用于胃癌细胞SHP1基因启动子区甲基化状态的检测;克隆MSP产物、Sanger测序、分析测序峰图;比较Bisulfite修饰前后序列并分析CpG位点甲基化状态.结果 MSP引物均位于SHP1基因第一外显子区近转录起始位点;CpG岛长度＞200 bp、GC含量＞50％、Obs/Exp＞0.60; MSP检测仅出现甲基化引物特异性扩增条带,提示该区域高甲基化.结论 胃癌细胞中SHP1基因启动子区CpG岛存在高甲基化.
作者：康亚妮；赖登攀；张晓丽；陈健；赵小东
来源：肿瘤防治研究 2014 年 41卷 8期
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