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[目的]探究微小RNA(microRNA,miR)-216a靶向调控酪氨酸蛋白激酶2/信号转导和转录激活因子3(Janus protein tyrosine protein kinase 2/signal transducer and activator of transcription 3,JAK2/STAT3)信号通路对鼻咽癌细胞增殖、侵袭、自噬及血管生成的影响.[方法] Target Scan Human预测miR-216a与JAK2的结合位点,双荧光素酶实验验证miR-216a与JAK2是否结合;免疫组化染色检测正常鼻咽黏膜组织、鼻咽癌组织标本p-JAK2、p-STAT3的表达水平,并分析p-JAK2、p-STAT3表达水平与患者临床病理参数的关系.采用LipofectamineTM3000将miR-216a模拟物双链小RNA、阴性对照双链小RNA转染至CNE-2细胞构建过表达miR-216a细胞系,细胞分为对照组、miR-NC组、miR-216a组.将抑制剂双链小RNA,抑制剂对照双链小RNA转染至CNE-2细胞构建低表达miR-216a细胞系,细胞分为对照组、抑制miR-NC组、抑制miR-216a组.采用qRT-PCR检测细胞JAK2、STAT3 mRNA表达水平;MTT法、Transwell小室、皮下种植瘤模型、小管形成实验、吖啶橙染色分别检测细胞增殖、侵袭、移植瘤生长、血管形成和自噬泡形成的能力;Western blot检测JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(microtubule-associated protein light chain 3-Ⅱ,CL3-Ⅱ)、酵母

作者:郑方静;赖红华;赖晓兰;包伟晶;富显果;周素娟;林益匡;黄传钱;武文娟

来源:肿瘤学杂志 2021 年 27卷 11期

知识库介绍

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作者:
郑方静;赖红华;赖晓兰;包伟晶;富显果;周素娟;林益匡;黄传钱;武文娟
来源:
肿瘤学杂志 2021 年 27卷 11期
标签:
微小RNA-216a;酪氨酸蛋白激酶2/信号转导和转录激活因子3信号通路;鼻咽癌;增殖;侵袭;自噬;血管生成
[目的]探究微小RNA(microRNA,miR)-216a靶向调控酪氨酸蛋白激酶2/信号转导和转录激活因子3(Janus protein tyrosine protein kinase 2/signal transducer and activator of transcription 3,JAK2/STAT3)信号通路对鼻咽癌细胞增殖、侵袭、自噬及血管生成的影响.[方法] Target Scan Human预测miR-216a与JAK2的结合位点,双荧光素酶实验验证miR-216a与JAK2是否结合;免疫组化染色检测正常鼻咽黏膜组织、鼻咽癌组织标本p-JAK2、p-STAT3的表达水平,并分析p-JAK2、p-STAT3表达水平与患者临床病理参数的关系.采用LipofectamineTM3000将miR-216a模拟物双链小RNA、阴性对照双链小RNA转染至CNE-2细胞构建过表达miR-216a细胞系,细胞分为对照组、miR-NC组、miR-216a组.将抑制剂双链小RNA,抑制剂对照双链小RNA转染至CNE-2细胞构建低表达miR-216a细胞系,细胞分为对照组、抑制miR-NC组、抑制miR-216a组.采用qRT-PCR检测细胞JAK2、STAT3 mRNA表达水平;MTT法、Transwell小室、皮下种植瘤模型、小管形成实验、吖啶橙染色分别检测细胞增殖、侵袭、移植瘤生长、血管形成和自噬泡形成的能力;Western blot检测JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(microtubule-associated protein light chain 3-Ⅱ,CL3-Ⅱ)、酵母