[目的]探讨RNF8在携带野生型表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)非小细胞肺癌吉非替尼(Gefitinib)耐药中的作用及机制.[方法]通过RNAi法敲低RNF8,通过CRISPR/Cas9方法敲除RNF8,采用细胞敏感性实验和细胞克隆形成实验法评估敲低或敲除RNF8的A549细胞对Gefitinib的敏感性变化;采用Western blot法检测细胞中p-EGFR、EGFR、p-Akt、Akt和RNF8的表达水平;以裸鼠异体成瘤模型评估在体内敲除RNF8对Gefitinib敏感性的影响;以药物浓度逐步递增法构建对Gefitinib耐药的A549稳定细胞系,通过药物敏感性实验检测敲低RNF8的耐药细胞系对Gefitinib敏感性变化.[结果]在A549细胞中敲低RNF8,与对照组相比,不同浓度(2、5、10 μmol/L)的Gefitinib对细胞的抑制率均显著增强(12.21％±1.68％vs 45.48％±1.35％;25.13％±1.57％vs 60.93％±1.40％;36.67％±5.89％vs 78.92％±2.36％)(P均＜0.001).在不同浓度(5、10 μmol/L)Gefitinib处理下,与对照组相比,RNF8敲除的A549细胞克隆形成数量显著减少(45.00±16.05 vs 26.00±4.18;34.33±9.82 vs 11.67±1.21)(P均＜0.001).机制上,在A549细胞中敲低或敲除RNF8,Gefitinib对细胞中Akt磷酸化水平的抑制作用增强;过表达RNF8,Gefitinib对细胞中Akt磷酸化水平的

作者：许永杰；陈万青

来源：肿瘤学杂志 2023 年 29卷 12期