目的 探讨苯并芘(BaP)对脆性组氨酸三联体(FHIT)、T-钙黏蛋白(CDH13)基因启动子区甲基化的影响及可能机制.方法 选取DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷作为阳性对照组,采用甲基化特异性PCR(MSP)法检测不同浓度BaP(0、0.1、1、10 μmol·L-1)作用于HepG2细胞后对FHIT、CDH13基因甲基化的影响;采用RT-qPCR、Western blot法检测BaP作用于HepG2细胞后对FHIT、CDH13基因以及DNA甲基化转移酶1(DNMT1)、转录因子Sp1的mRNA与蛋白表达的影响.结果 与对照组相比,阳性对照组中CDH13、FHIT基因呈现非甲基化状态,随着BaP浓度的增加,FHIT、CDH13基因甲基化条带(M条带)亮度逐渐增强,非甲基化条带(U条带)亮度逐渐减弱,MSP法检测结果表明BaP可能有促进FHIT、CDH13基因甲基化的作用.RT-qPCR与Western blot法检测结果显示随着BaP浓度的增加,FHIT、CDH13基因的mRNA与蛋白表达量逐渐减少,与对照组相比,BaP中、高剂量组中FHIT、CDH13的表达显著降低(P＜0.05);DNMT1、Sp1的mRNA与蛋白表达显著增加(P＜0.05).结论 BaP具有促甲基化的作用,其机制可能是通过促进Sp1,进而促进DNMT1的表达,使DNMTs活性被增强或浓度过大,增强了原有的甲基化状态,从而促进FHIT、CDH13基因启动子区甲基化.

作者：武岳；张梦迪；李君；王冬雪；白图雅；吕晓丽；胡玉霞；高峰；周树宏；李京慧；范兴业；常福厚；王光

来源：中南药学 2022 年 20卷 9期