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目的 基于Toll样受体4(TLR4)-酪氨酸激酶(SRC)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/核转录因子-κB(NF-κB)通路探讨鞣花酸的抗炎机制.方法 采用不同浓度(0、0.5、5、25、50、75、100 μmol·L-1)鞣花酸对RAW264.7巨噬细胞[或脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞]干预24h,噻唑蓝(MTT)法检测RAW264.7 巨噬细胞存活率,筛选最适给药浓度.实验分为空白对照组,模型组(0.5mg·L-1LPS),阳性对照地塞米松组(10μmol·L-1),鞣花酸(5、25、50 μmol·L-1)给药组.Griess法检测细胞上清液中一氧化氮(NO)的含量;采用ELISA法检测细胞上清液中前列腺素-2(PGE2)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平;采用Western blot法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、环氧合酶-2(COX-2)蛋白以及TLR4-SRC/MAPK/NF-κB通路相关蛋白的表达水平.结果 MTT结果筛选出鞣花酸的干预浓度为5~50 μmol·L-1.与空白对照组比较,模型组PGE2、NO和炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α表达显著升高(P<0.01);炎症标志物iNOS、COX-2蛋白表达水平显著升高(P<0.01),说明炎症模型建立成功.与模型组比较,鞣花酸能显著抑制LPS诱导NO、PGE2 的产生和降低 TNF-α、IL-1β、IL-6 水平(P<0.05,P<0.01),降低 iNOS、COX-2蛋白表达水平(P

作者:乌里盼·托乎达阿里;丁宛婷;孙媛;周茂杰;姚雨含;赵军

来源:中南药学 2024 年 22卷 4期

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作者:
乌里盼·托乎达阿里;丁宛婷;孙媛;周茂杰;姚雨含;赵军
来源:
中南药学 2024 年 22卷 4期
标签:
鞣花酸 抗炎作用 RAW264.7巨噬细胞 SRC蛋白激酶 MAPK通路 NF-κB通路 ellagic acid anti-inflammatory effect RAW264.7 macrophage SRC protein kinase MAPK pathway NF-κB pathway
目的 基于Toll样受体4(TLR4)-酪氨酸激酶(SRC)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/核转录因子-κB(NF-κB)通路探讨鞣花酸的抗炎机制.方法 采用不同浓度(0、0.5、5、25、50、75、100 μmol·L-1)鞣花酸对RAW264.7巨噬细胞[或脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞]干预24h,噻唑蓝(MTT)法检测RAW264.7 巨噬细胞存活率,筛选最适给药浓度.实验分为空白对照组,模型组(0.5mg·L-1LPS),阳性对照地塞米松组(10μmol·L-1),鞣花酸(5、25、50 μmol·L-1)给药组.Griess法检测细胞上清液中一氧化氮(NO)的含量;采用ELISA法检测细胞上清液中前列腺素-2(PGE2)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平;采用Western blot法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、环氧合酶-2(COX-2)蛋白以及TLR4-SRC/MAPK/NF-κB通路相关蛋白的表达水平.结果 MTT结果筛选出鞣花酸的干预浓度为5~50 μmol·L-1.与空白对照组比较,模型组PGE2、NO和炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α表达显著升高(P<0.01);炎症标志物iNOS、COX-2蛋白表达水平显著升高(P<0.01),说明炎症模型建立成功.与模型组比较,鞣花酸能显著抑制LPS诱导NO、PGE2 的产生和降低 TNF-α、IL-1β、IL-6 水平(P<0.05,P<0.01),降低 iNOS、COX-2蛋白表达水平(P