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以3-5天苗龄的散叶大速生生菜(Lactuca sativa var.capatata)无菌苗子叶为外植体,通过根癌农杆菌介导,将携带O型和A型口蹄疫抗原决定簇融合基因O21-O14-A21-HBcAg导入生菜.研究结果表明,含有20 mg·L-1潮霉素(Hyg)的S2培养基(MS+1.5 mg·L-1 6-BA+0.2 mg·L-1IAA+20 mg·L-1Hyg+300 mg·L-1Cb)为子叶外植体转化后诱导愈伤和芽再生的最适培养基,经抗性筛选,将抗性芽切下于S3培养基(1/2MS+20 mg·L-1Hyg)上诱导生根.通过PCR和Southern杂交分析证明,基因已经整合到生菜基因组中.RT-PCR检测初步表明,O21-O14-A21-HBcAg基因可以在生菜中正常转录.

作者:邓小莉;常景玲

来源:植物学通报 2007 年 24卷 5期

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作者:
邓小莉;常景玲
来源:
植物学通报 2007 年 24卷 5期
标签:
根癌农杆菌 口蹄疫抗原决定簇 基因表达 生菜
以3-5天苗龄的散叶大速生生菜(Lactuca sativa var.capatata)无菌苗子叶为外植体,通过根癌农杆菌介导,将携带O型和A型口蹄疫抗原决定簇融合基因O21-O14-A21-HBcAg导入生菜.研究结果表明,含有20 mg·L-1潮霉素(Hyg)的S2培养基(MS+1.5 mg·L-1 6-BA+0.2 mg·L-1IAA+20 mg·L-1Hyg+300 mg·L-1Cb)为子叶外植体转化后诱导愈伤和芽再生的最适培养基,经抗性筛选,将抗性芽切下于S3培养基(1/2MS+20 mg·L-1Hyg)上诱导生根.通过PCR和Southern杂交分析证明,基因已经整合到生菜基因组中.RT-PCR检测初步表明,O21-O14-A21-HBcAg基因可以在生菜中正常转录.