目的 探索地塞米松人工诱导猪卵泡膜细胞产生胰岛素抵抗,以及中药小檗碱和葛根素对胰岛素抵抗的卵泡膜细胞功能的调控作用.方法 收集新鲜猪卵泡膜细胞进行体外培养,经地塞米松作用48 h后,检测猪卵泡膜细胞对糖利用率情况.同时采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质免疫印迹技术(West blotting),检测小檗碱和葛根素对卵泡膜细胞内胰岛素信号传导分子和甾体激素合成的影响,采用化学发光法测定激素水平.结果 (1)地塞米松作用48 h后细胞内[3-<'3>H]标记的葡萄糖摄取量降低约1/2;细胞上清液葡萄糖含量升高约1/3.(2)RT-PCR和West blotting结果显示:卵泡膜细胞产生胰岛素抵抗后,胰岛素受体底物-1(IRS-1)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的mRNA和蛋白表达水平下降;过氧化酶活化增生受体(PPAR)γ和细胞色素P450 17羟化酶(CYP17)的mRNA或蛋白表达水平上升.应用中药小檗碱和葛根素进一步作用48 h后,抵抗细胞内的上述胰岛素信号分子和CYP17表达明显逆转.(3)猪卵泡膜细胞产生胰岛素抵抗后,睾酮(T,mg/L)水平模型组(0.82±0.20)较对照组(0.38±0.01)升高(P<0.05),小檗碱组(0.44±0.24)和葛根素组(0.45±0.21)比模型组降低(P<0.05).血清孕酮(P)水平各组未见明显变化(P>0.05).结论 卵泡膜细胞产生胰岛素抵抗后雄激素合成能力显
作者:高磊;李威;匡洪影;侯丽辉;吴效科
来源:中国中西医结合杂志 2009 年 29卷 7期