目的 研究补骨脂素(psoralen,PSO)加长波紫外线(ultraviolet A,UVA)的光化学疗法(PUVA)对人白血病NB4细胞凋亡和细胞凋亡信号通路的影响.方法体外培养NB4细胞,利用流式细胞术检测不同浓度的PSO(0、5、1 0、20、40 μL)、在不同照射时间(0、5 min)、波长为360 nm的UVA干预后的细胞凋亡率;利用透射电镜检测细胞超微结构的改变;采用免疫细胞化学法(ICC)检测凋亡信号通路中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(Cas pase-8)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cas pase-3)蛋白表达情况.结果不同浓度的PSO经0、5 min UVA照射后,NB4细胞的凋亡率呈剂量与时间依赖性的增加,而于40 μg/mL浓度的PSO联合5 min UVA照射时达峰值,且二者呈现交互作用(P<0.01).PUVA处理后的NB4细胞超微结构出现明显的凋亡形态学的改变.PSO、UVA及PUVA均上调Caspase-8、Caspase-3蛋白的表达,但PUVA上调Caspase-3的作用于12h显著强于前两者(P<0.01),呈时间依赖性,PSO浓度与时间呈现交互作用(P<0.01).结论 PUVA的最佳方案组合为40 μg/mL浓度的PSO联合5 min UVA照射,PUVA可体外激活Caspase-8、Caspase-3基因,具有诱导NB4细胞凋亡作用.
作者:孙淑君;赵伟杰;向阳;陈楠楠;孙锋;常晓慧;成玉斌;黄世林
来源:中国中西医结合杂志 2013 年 33卷 4期