研究淫羊藿苷对体外培养大鼠乳鼠颅骨成骨细胞(Rat calvarial osteoblasts,ROB)增殖和分化成熟的影响.方法:取新生SD大鼠颅骨,多次酶消化法培养ROB,每3d换液1次,铺满80％皿底后传代培养.采用终浓度分别为1×10-4、1×10-5、1×10-6、1×10-7 mol/L的淫羊藿苷进行药物干预,MTT法检测细胞增殖率,同时检测成骨性诱导培养9d后的碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)活性,筛选出最佳浓度.以最佳药物浓度干预ROB的分化成熟,比较淫羊藿苷组和不加药的对照组之间的钙化结节数量及碱性磷酸酶阳性克隆数(colonies stained positive for alkaline phosphatase,CFU-FALP)；提取总RNA,Real Time RT-PCR检测Runx-2与Osterix mRNA 的表达情况；Western-blot法检测Ⅰ型胶原蛋白的分泌量.结果:淫羊藿苷剂量依赖性抑制细胞的增殖,但可强烈促进ROB的分化成熟,最佳药物浓度为1×10-5 mol/L.该浓度下的淫羊藿苷可显著增加钙化结节和CFU-FALP数量,促进与成骨相关的转录因子Runx-2与Osterix mRNA的表达,同时也可增强Ⅰ型胶原蛋白的分泌.结论:浓度为1×10-5 mol/L的淫羊藿苷可显著促进ROB的分化成熟,提示淫羊藿苷有较强的促骨形成活性,具备开发为抗骨质疏松新药的潜力.
作者：翟远坤；李志忠；陈克明；张娜；程国政；朱瑞清
来源：中药材 2011 年 34卷 6期
