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目的:采用玻璃化超低温技术保存濒危药用植物麻花秦艽的休眠芽.方法:以休眠芽作试材,研究休眠芽大小、不同的预处理方法、装载时间和玻璃化保护液等因素对休眠芽超低温保存效果的影响.结果:10 ~ 11 mm大小的休眠芽在含有0.3 mol/L、0.5 mol/L、0.7mol/L蔗糖的MS培养基中暗培养各1d,在装载液(2 mol/L甘油+0.4 mol/L蔗糖)中20℃处理20 min,于玻璃化保护液PVS2(30%甘油+15%乙二醇+15%二甲基亚砜+0+4mol/L蔗糖)中0℃处理40 min,换新鲜PVS2保护液并迅速投入液氮,液氮中保存24 h后,在40℃水浴中解冻2~3 min,用含1.2 mol/L蔗糖的1/2MS无机盐液体培养基洗涤2次,每次10 min,无菌滤纸吸干后接种到恢复培养基中,在22℃条件下暗培养1周后转入正常条件培养,再生率高达83.3%.结论:建立了高效的麻花秦艽休眠芽玻璃化超低温保存技术体系.

作者:晋玲;刘进;张延红;朱田田;陈红刚

来源:中药材 2012 年 35卷 9期

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作者:
晋玲;刘进;张延红;朱田田;陈红刚
来源:
中药材 2012 年 35卷 9期
标签:
麻花秦艽 休眠芽 超低温保存 玻璃化法
目的:采用玻璃化超低温技术保存濒危药用植物麻花秦艽的休眠芽.方法:以休眠芽作试材,研究休眠芽大小、不同的预处理方法、装载时间和玻璃化保护液等因素对休眠芽超低温保存效果的影响.结果:10 ~ 11 mm大小的休眠芽在含有0.3 mol/L、0.5 mol/L、0.7mol/L蔗糖的MS培养基中暗培养各1d,在装载液(2 mol/L甘油+0.4 mol/L蔗糖)中20℃处理20 min,于玻璃化保护液PVS2(30%甘油+15%乙二醇+15%二甲基亚砜+0+4mol/L蔗糖)中0℃处理40 min,换新鲜PVS2保护液并迅速投入液氮,液氮中保存24 h后,在40℃水浴中解冻2~3 min,用含1.2 mol/L蔗糖的1/2MS无机盐液体培养基洗涤2次,每次10 min,无菌滤纸吸干后接种到恢复培养基中,在22℃条件下暗培养1周后转入正常条件培养,再生率高达83.3%.结论:建立了高效的麻花秦艽休眠芽玻璃化超低温保存技术体系.