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目的:利用杜仲药材及其混伪品的rDNA-ITS序列差异设计DNA特异引物,实现杜仲药材的快速分子标记鉴定.方法:从NCBI数据库下载杜仲药材及其混伪品的rDNA-ITS序列,比对获得差异DNA片段,设计特异性引物,优化PCR扩增条件和检测方法.结果:扩增产物经琼脂糖凝胶电泳和荧光反应检测,杜仲药材能扩增400bp的鉴定条带,加入SYBR Green Ⅰ染料后在紫外光下有绿色荧光,而其混伪品不具特异条带和绿色荧光.结论:特异性PCR能有效鉴别杜仲药材及其混伪品,通过条件优化显著缩短PCR扩增时间,荧光染料检测能更直观显示鉴定结果,为杜仲药材的快速鉴定提供了新的思路和方法.

作者:丁铃;赵丹;周涛;江维克;肖承鸿

来源:中药材 2015 年 38卷 4期

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作者:
丁铃;赵丹;周涛;江维克;肖承鸿
来源:
中药材 2015 年 38卷 4期
标签:
杜仲 rDNA-ITS 荧光检测 分子鉴定 Eucommmia ulmoides Oliv. rDNA-ITS Fluorescence detection Molecular identification
目的:利用杜仲药材及其混伪品的rDNA-ITS序列差异设计DNA特异引物,实现杜仲药材的快速分子标记鉴定.方法:从NCBI数据库下载杜仲药材及其混伪品的rDNA-ITS序列,比对获得差异DNA片段,设计特异性引物,优化PCR扩增条件和检测方法.结果:扩增产物经琼脂糖凝胶电泳和荧光反应检测,杜仲药材能扩增400bp的鉴定条带,加入SYBR Green Ⅰ染料后在紫外光下有绿色荧光,而其混伪品不具特异条带和绿色荧光.结论:特异性PCR能有效鉴别杜仲药材及其混伪品,通过条件优化显著缩短PCR扩增时间,荧光染料检测能更直观显示鉴定结果,为杜仲药材的快速鉴定提供了新的思路和方法.