您的账号已在其他设备登录,您当前账号已强迫下线,
如非您本人操作,建议您在会员中心进行密码修改

确定
收藏 | 浏览70 | 下载0

目的 分析ATPase6,8在纳米氧化锌(ZnO NP)诱导正常人肝细胞(HL-7702)线粒体氧化磷酸化能量代谢障碍中的作用,为ZnO NP疾病防控提供基础数据.方法 透射电镜和马尔文粒径分析仪测定ZnO NP颗粒表征;ZnO NP染毒24 h后,3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二甲苯溴化四唑(MTT)法检测细胞活性及剂量选择;激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位改变;高效液相色谱法测定细胞内三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷(AMP)的含量;紫外分光光度计检测线粒体呼吸链复合体V(MRCCV)活性;qRT-PCR检测ATPase6及ATPase8 mRNA表达量.结果 ZnO NP(2.5、5、10、20、40、80、160和320 μg/mL)染毒24 h后,随着ZnO NP剂量增加,细胞存活率逐渐降低(r=-0.859,P<0.05),80、160、320 μg/mL剂量组细胞存活率显著低于对照组(P<0.05),根据细胞存活率>70%,最终选择染毒剂量为0、2.5、10、40 μg/mL;与对照组相比,10和40 μg/mL剂量组红/绿色荧光比值明显减少(P<0.05),说明细胞线粒体膜电位(MMP)下降;同样40 μg/mL剂量组细胞ATP、总腺普酸含量(TAN)、能荷值(EC)水平均明显下降,10~40 μ.g/mL剂量组细胞AMP水平和2.5~40 μg/mL剂量组细胞ATP/ADP水平也均明显下降(P<0.01);与对照组相比,2.5~40 μg/mL剂量组细胞MRCC V活性明显降低而

作者:徐幽琼;廖静岚;周美龄;叶友斌;张晓阳

来源:职业与健康 2020 年 36卷 22期

知识库介绍

临床诊疗知识库该平台旨在解决临床医护人员在学习、工作中对医学信息的需求,方便快速、便捷的获取实用的医学信息,辅助临床决策参考。该库包含疾病、药品、检查、指南规范、病例文献及循证文献等多种丰富权威的临床资源。

详细介绍
热门关注
免责声明:本知识库提供的有关内容等信息仅供学习参考,不代替医生的诊断和医嘱。

收藏
| 浏览:70 | 下载:0
作者:
徐幽琼;廖静岚;周美龄;叶友斌;张晓阳
来源:
职业与健康 2020 年 36卷 22期
标签:
纳米氧化锌 正常人体肝细胞 能量代谢 线粒体膜电位 线粒体呼吸链复合体V ATPase6,8
目的 分析ATPase6,8在纳米氧化锌(ZnO NP)诱导正常人肝细胞(HL-7702)线粒体氧化磷酸化能量代谢障碍中的作用,为ZnO NP疾病防控提供基础数据.方法 透射电镜和马尔文粒径分析仪测定ZnO NP颗粒表征;ZnO NP染毒24 h后,3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二甲苯溴化四唑(MTT)法检测细胞活性及剂量选择;激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位改变;高效液相色谱法测定细胞内三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷(AMP)的含量;紫外分光光度计检测线粒体呼吸链复合体V(MRCCV)活性;qRT-PCR检测ATPase6及ATPase8 mRNA表达量.结果 ZnO NP(2.5、5、10、20、40、80、160和320 μg/mL)染毒24 h后,随着ZnO NP剂量增加,细胞存活率逐渐降低(r=-0.859,P<0.05),80、160、320 μg/mL剂量组细胞存活率显著低于对照组(P<0.05),根据细胞存活率>70%,最终选择染毒剂量为0、2.5、10、40 μg/mL;与对照组相比,10和40 μg/mL剂量组红/绿色荧光比值明显减少(P<0.05),说明细胞线粒体膜电位(MMP)下降;同样40 μg/mL剂量组细胞ATP、总腺普酸含量(TAN)、能荷值(EC)水平均明显下降,10~40 μ.g/mL剂量组细胞AMP水平和2.5~40 μg/mL剂量组细胞ATP/ADP水平也均明显下降(P<0.01);与对照组相比,2.5~40 μg/mL剂量组细胞MRCC V活性明显降低而