目的 分析ATPase6,8在纳米氧化锌(ZnO NP)诱导正常人肝细胞(HL-7702)线粒体氧化磷酸化能量代谢障碍中的作用,为ZnO NP疾病防控提供基础数据.方法 透射电镜和马尔文粒径分析仪测定ZnO NP颗粒表征;ZnO NP染毒24 h后,3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二甲苯溴化四唑(MTT)法检测细胞活性及剂量选择;激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位改变;高效液相色谱法测定细胞内三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷(AMP)的含量;紫外分光光度计检测线粒体呼吸链复合体V(MRCCV)活性;qRT-PCR检测ATPase6及ATPase8 mRNA表达量.结果 ZnO NP(2.5、5、10、20、40、80、160和320 μg/mL)染毒24 h后,随着ZnO NP剂量增加,细胞存活率逐渐降低(r=-0.859,P<0.05),80、160、320 μg/mL剂量组细胞存活率显著低于对照组(P<0.05),根据细胞存活率>70%,最终选择染毒剂量为0、2.5、10、40 μg/mL;与对照组相比,10和40 μg/mL剂量组红/绿色荧光比值明显减少(P<0.05),说明细胞线粒体膜电位(MMP)下降;同样40 μg/mL剂量组细胞ATP、总腺普酸含量(TAN)、能荷值(EC)水平均明显下降,10~40 μ.g/mL剂量组细胞AMP水平和2.5~40 μg/mL剂量组细胞ATP/ADP水平也均明显下降(P<0.01);与对照组相比,2.5~40 μg/mL剂量组细胞MRCC V活性明显降低而
作者:徐幽琼;廖静岚;周美龄;叶友斌;张晓阳
来源:职业与健康 2020 年 36卷 22期