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建立增强型绿色荧光蛋白标记间充质干细胞(MSCs)的方法,并观察标记方法对MSCs的分化功能影响.方法应用密度梯度离心法和贴壁培养法分离、培养兔外周血MSCs,以携带EGFP的腺病毒(Ad-CMV-EGFP)转染MSCs,荧光倒置显微镜下观察其瞬时表达及转染效率,并对转染后的MSCs进行诱导分化为内皮细胞以观察其部分分化功能.结果①MSCs于体外培养14～20d可达到80％～90％融合,细胞形态为梭形、多角形及纺锤状等.传代MSCs变为形态均一、排列有序的长梭形细胞,增殖活跃;②MSCs经携带EGFP腺病毒转染后24h即可表达EGFP,4～5d时表达最强,此后逐渐减弱,2wk时明显减弱,到4wk时无EGFP表达;③测定腺病毒转染MSCs效率约为60％:④经诱导后分化的内皮细胞呈铺路石样排列,CD31呈阳性表达.结论Ad-CMV-EGFP转染后的MSCs可有效表达EGFP,且本法转染效率较高,基本不影响细胞分化功能,是一种较好的MSCs标记方法.
作者：王冬梅；石蓓；许官学；刘志江；赵然尊
来源：遵义医学院学报 2011 年 34卷 2期
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