目的:观察头蛋白shRNA和骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)的协同作用对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨能力的影响.方法:分离、培养兔BMSCs,分为头蛋白shRNA基因干扰组、BMP-2过表达组、双基因转染组.构建慢病毒头蛋白shRNA干扰载体和BMP-2过表达载体.头蛋白shRNA基因干扰组、BMP-2过表达组分别加入头蛋白shRNA基因干扰载体和BMP-2过表达载体,双基因转染组同时加入头蛋白shRNA基因干扰载体和BMP-2过表达载体,进行基因转染.基因转染成功后,采用荧光定量PCR检测3组BMSCs中头蛋白和BMP-2的mRNA相对表达量,采用茜素红染色和碱性磷酸酶染色检测3组BMSCs的诱导成骨能力.结果:①细胞培养和基因转染鉴定结果.流式细胞仪检测第2代培养细胞,CD44和CD29表达分别为61.3％和57.2％,CD34和CD45表达分别为3.6％和2.4％,符合BMSCs表型特征.基因转染72 h后,3组BMSCs的转染率为(92.5±2.5)％,基因转染成功.②头蛋白和BMP-2 mRNA表达检测结果.基因转染成功后,3组细胞中头蛋白mRNA相对表达量的组间总体比较,差异有统计学意义(0.343±0.124,1.040±0.269,0.123±0.057;F=22.390,P=0.002);BMP-2过表达组较头蛋白shRNA基因干扰组和双基因转染组高(P=0.016,P=0.005),头蛋白s

作者：张瑞萍；邱相君；苏兵；郑路路

来源：中医正骨 2019 年 31卷 9期