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目的:观察蒺藜皂苷对白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)诱导的软骨细胞凋亡和炎症因子分泌的影响,并探讨其作用机制.方法:①软骨细胞培养和转染.采用DMEM培养液培养小鼠软骨细胞(ATDC5 细胞),培养后采用转染试剂分别转染pcDNA-circ_0045714、pcDNA、si-circ_0045714、si-NC.②蒺藜皂苷浓度筛选.将ATDC5 细胞接种于96 孔板中,一组正常培养(正常组),一组加入10 ng·mL-1 的IL-1β(IL-1β组),其他组在加入 10 ng·mL-1 IL-1β的基础上分别加入浓度为 25 μg·mL-1、50 μg·mL-1、100 μg·mL-1、200 μg·mL-1、400 μg·mL-1的蒺藜皂苷.培养后计算软骨细胞存活率,并确定后续实验蒺藜皂苷的浓度.③软骨细胞增殖抑制率检测.将ATDC5 细胞分为对照组、IL-1β组、IL-1β+蒺藜皂苷低剂量组、IL-1β+蒺藜皂苷中剂量组、IL-1β+蒺藜皂苷高剂量组,其中对照组采用常规培养液培养,IL-1β组采用含10 ng·mL-1 的IL-1β培养液培养,IL-1β+蒺藜皂苷低、中、高剂量组分别采用含50 μg·mL-1、100 μg·mL-1、200 μg·mL-1的蒺藜皂苷和10 ng·mL-1的IL-1β培养液培养.转染pcDNA-circ_0045714、pcDNA的ATDC5 细胞,培养方法同IL-1β组,并分别标记为IL-1β+pcDNA-circ_0045714 组、IL-1β+pcDNA组.转染si-circ_00

作者:于兰;解冬千;王霞;及超

来源:中医正骨 2024 年 36卷 1期

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作者:
于兰;解冬千;王霞;及超
来源:
中医正骨 2024 年 36卷 1期
标签:
骨关节炎 软骨细胞 细胞凋亡 蒺藜 皂苷类 白细胞介素-1β RNA,环状 炎症介导素类 osteoarthritis chondrocytes apoptosis fructus tribuli saponins interleukin-1 beta RNA,circular inflammation mediators
目的:观察蒺藜皂苷对白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)诱导的软骨细胞凋亡和炎症因子分泌的影响,并探讨其作用机制.方法:①软骨细胞培养和转染.采用DMEM培养液培养小鼠软骨细胞(ATDC5 细胞),培养后采用转染试剂分别转染pcDNA-circ_0045714、pcDNA、si-circ_0045714、si-NC.②蒺藜皂苷浓度筛选.将ATDC5 细胞接种于96 孔板中,一组正常培养(正常组),一组加入10 ng·mL-1 的IL-1β(IL-1β组),其他组在加入 10 ng·mL-1 IL-1β的基础上分别加入浓度为 25 μg·mL-1、50 μg·mL-1、100 μg·mL-1、200 μg·mL-1、400 μg·mL-1的蒺藜皂苷.培养后计算软骨细胞存活率,并确定后续实验蒺藜皂苷的浓度.③软骨细胞增殖抑制率检测.将ATDC5 细胞分为对照组、IL-1β组、IL-1β+蒺藜皂苷低剂量组、IL-1β+蒺藜皂苷中剂量组、IL-1β+蒺藜皂苷高剂量组,其中对照组采用常规培养液培养,IL-1β组采用含10 ng·mL-1 的IL-1β培养液培养,IL-1β+蒺藜皂苷低、中、高剂量组分别采用含50 μg·mL-1、100 μg·mL-1、200 μg·mL-1的蒺藜皂苷和10 ng·mL-1的IL-1β培养液培养.转染pcDNA-circ_0045714、pcDNA的ATDC5 细胞,培养方法同IL-1β组,并分别标记为IL-1β+pcDNA-circ_0045714 组、IL-1β+pcDNA组.转染si-circ_00