目的 探讨枳术丸治疗慢传输型便秘的可能作用机制.方法 20只SD雄性大鼠随机分为枳术丸汤剂组、空白组,每组10只.枳术丸汤剂组大鼠每日给予浓度为2g/ml枳术丸汤剂5.8g灌胃,连续7天,空白组正常饲养.末次给药后1 h腹主动脉采血离心制备含药血清.采用CCK8法观察磷脂酶C-γ(PLC-γ)特异性抑制剂U73122对大鼠结肠原代Cajal间质细胞的细胞抑制率来筛选药物浓度,观察5％、10％、15％、20％浓度的枳术丸汤剂含药血清对Cajal间质细胞的细胞增殖率筛选药物浓度,并分别培养12、24、48h来筛选用药时间.取二或三代Cajal间质细胞接种至96孔板中,每孔1×104个细胞,每组重复3孔.实验分为正常组、模型组(正常细胞+筛选浓度的U73122)、空白血清组(模型组+10％空白血清)、枳术丸汤剂血清组(模型组+筛选浓度枳术丸含药血清).干预时间为实验筛选出的时间.免疫组化法检测磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)、磷脂酶C-γ2(PLC-γ2)阳性表达,Western blot法检测PLC-γ1、PLC-γ2蛋白表达,RT-PCR法检测PLC--γ1、PLC-γ2基因表达.结果 筛选出U73122最佳实验药物浓度为30μmol/L,枳术丸汤剂组最佳用药浓度为5％,实验最佳干预时间为24h.与正常组比较,模型组PLC-γ1、PLC-γ2平均光密度值、蛋白及基因表达均降低(P＜0.01);与模型组比较,枳术丸汤剂血
作者：夏旭婷；王婷；刘富林；涂琴蓉；滕广飞
来源：中医杂志 2021 年 62卷 21期
